INTRODUCCIÓ: Les neoplàsies colorectals ocupen actualment els primers llocs de les
neoplàsies més freqüents i també són les que causen més morts. Tot i que per una
banda, en els últims anys les millores en els tractaments quirúrgic, neoadjuvant i
adjuvant han contribuït a l'augment de la supervivència i al percentatge de curacions.
Per l'altra, es continuen fent servir els mateixos factors pronòstics que fa uns anys,
principalment les classificació de Dukes i Astler-Coller i l'estadi TNM. El fet que la
carcinogènesi colorectal sigui una de les més ben estudiades permet que els gens o
factors que es veuen alterats durant aquest procés puguin ser estudiats com a
possibles factors pronòstics per preveure l'evolució de la malaltia. L'activitat de la
telomerasa (AT), la longitud del telòmer (LT) i l'expressió del TRF1 han estat els factors
escollits per a ser estudiats com a factors pronòstics per la seva implicació en la
regulació i homeòstasi dels telòmers, els quals tenen un paper important en l'estabilitat
del genoma, la viabilitat cel·lular i el desenvolupament del procés carcinogènic.
HIPÒTESIS: Estudiar dins la nostra sèrie de pacients amb càncer colorectal (CCR)
l'activitat de la telomerasa, la longitud del telòmer (LT) i l'expressió del TRF1, veure com
es comporten dins la seqüència adenoma-carcinoma i determinar si poden ser nous
factors pronòstics independents per al temps lliure de malaltia i de supervivència
global.
PACIENTS I MÈTODES: L'AT es va determinar per la tècnica F-TRAP en la mucosa
tumoral, transicional, normal i pòlips. La LT es va analitzar per mitjà del Southern-blot en
la mucosa tumoral, normal, pòlips i sang de pacients amb CCR i en sang i mucosa
colònica de pacients sense cap afectació colorectal. L'expressió del TRF1 es va
determinar per Western-blot en mucosa tumoral i normal de pacients amb CCR. Es van
relacionar l'AT, la LT i l'expressió del TRF1 entre sí i amb les característiques
anatomopatològiques dels pacients. Els pacients van ser seguits durant els 4 anys
següents ala cirurgia i els anàlisis del temps lliure de malaltia i de la supervivència així
com la recerca de factors pronòstics independents es va realitzar als 2 i als 4 anys.
RESULTATS: L'AT en la mucosa tumoral era significativament més elevada que en la
mucosa normal, mentre entre les mucoses transicional i normal les diferències no eren
significatives. L'AT en els pòlips era més elevada que en la mucosa normal però inferior
a la de la mucosa tumoral, i els pòlips aïllats tenien una AT superior que els pòlips
sincrònics. La mitjana de la LT en la mucosa tumoral era significativament més curta
que la de la mucosa normal. Comparant la LT tumoral-normal de cada pacient
obteníem que un 55% dels tumors mantenien la LT similar respecte la corresponent
mucosa normal, un 10% els allargaven i un 35% els escurçaven. La LT en la mucosa
tumoral i normal presentaven un comportament paral·lel. La LT no es correlacionava
amb l'AT. La longitud del telòmer en sang va ser molt similar entre els pacients amb i
sense CCR però la LT en la mucosa normal dels pacients amb CCR era molt més curta
que en la mucosa colònica dels pacients sans. La LT dels pacients sans es
correlacionava amb l'edat, en la sang i també en la mucosa colònica. Les mostres
tumorals expressaven majors nivells de TRF1 i l'expressió del TRF1 semblava estar
relacionada amb la LT però no amb l'AT. Els pòlips van presentar una AT superior a la
corresponent mucosa normal i inferior a la tumoral i també van mostrar telòmers més
curts que la mucosa normal però més llargs que la tumoral. La ràtio de la longitud del
telòmer (RLT) va ser factor pronòstic independent per la supervivència als 2 anys en els
malalts de còlon. L'IT va ser un factor pronòstic independent per a la progressió de la
malaltia als 2 anys i per a la supervivència global als 2 i 4 anys només en els malalts de
recte.
CONCLUSIONS: L'AT augmenta a mesura que ho fa el grau de malignitat del tumor
mentre que la LT disminueix. L'IT (índex de la telomerasa) és un factor pronòstic
independent per a la progressió de la malaltia als 2 anys i per a la supervivència als 2 i
als 4 anys en els pacients amb càncer de recte. La ràtio de la longitud del telòmer era
un factor pronòstic independent per al temps de supervivència global als 2 anys en els
pacients amb càncer de còlon.

INTRODUCCIÓN: La neoplasia colorrectal ocupa el segundo lugar entre las más
frecuentes y también es la segunda que causa más muertes. Aunque, en los últimos
años las mejoras en los tratamientos quirúrgicos, neoadyuvantes y adyuvantes han
contribuido al aumento de la supervivencia y al porcentaje de curaciones. Por otra
parte, se continúan usando los mismos factores pronóstico que hace unos años,
variables anatomopatológicas del tumor. El hecho que la carcinogénesis colorrectal
sea una de las más bien estudiadas permite que los genes o factores que se ven
alterados durante este proceso puedan ser estudiados como posibles factores
pronóstico para prever la evolución de la enfermedad. La actividad de la telomerasa
(AT), la longitud del telómero (LT) y la expresión del TRF1 (factor 1 de unión al telómero)
han sido los factores escogidos para ser estudiados como factores pronóstico por su
implicación en la regulación y homeostasis de los telómeros, los cuales tienen un papel
importante en la estabilidad del genoma, la viabilidad celular y en el desarrollo
carcinogénico.
HIPÓTESIS: Estudiar dentro de nuestra serie de pacientes con cáncer colorrectal (CCR)
la actividad de la telomerasa, la longitud del telómero (LT) y la expresión del TRF1,
observar como se comportan dentro de la secuencia adenoma-carcinoma y
determinar si pueden ser nuevos factores pronósticos independientes para el tiempo
libre de enfermedad y de supervivencia global.
PACIENTES Y MÉTODOS: La AT fue determinada mediante la técnica F-TRAP en la
mucosa tumoral, transicional, normal y de pólipos colorrectales. La LT se analizó
mediante Southern-blot en la mucosa tumoral, normal, pólipos y sangre de pacientes
con CCR y en sangre y mucosa colónica de pacientes sin ninguna afectación
colorrectal. La expresión del TRF1 fue determinada por Western-blot en mucosa
tumoral y normal de pacientes con CCR. Se relacionaron la AT, la LT y la expresión del
TRF1 entre sí y con las características anatomopatológicas. Se realizaron los análisis del
tiempo libre de enfermedad y del tiempo de supervivencia y se estudiaron los factores
pronósticos independientes a los 2 y 4 años.
RESULTADOS: La AT en la mucosa tumoral fue más elevada que en la mucosa normal
(p< 0.001), mientras que entre las mucosas transicional y normal las diferencies no
fueron significativas. La AT en los pólipos fue más elevada que en la mucosa normal
pero inferior que en la mucosa tumoral, y los pólipos aislados presentaron una AT
superior que los pólipos sincrónicos (p = 0.020). La media de la LT en la mucosa tumoral
fue más corta que en la mucosa normal (p < 0.001). Comparando la LT tumoral-normal
de cada paciente obtuvimos que la LT era mantenida en un 55% de los tumores,
alargada en un 10% y acortada en un 35%. La LT en la mucosa tumoral y normal
presentaba un comportamiento paralelo (p < 0.001). La LT no se correlacionó con la
AT. La LT en sangre fue muy similar entre los pacientes con y sin CCR pero la LT en la
mucosa normal de los pacientes con CCR fue más corta que en la mucosa colónica
de los pacientes sanos. La LT de los pacientes sanos se correlacionó con la edad, en
sangre y también en la mucosa colónica (p <0.001; p = 0.037). Las muestras tumorales
expresaron niveles mayores de TRF1 y la expresión del TRF1 parecía estar relacionada
con la LT pero no con la AT. Los pólipos presentaron una AT superior a la
correspondiente mucosa normal y inferior a la tumoral y también mostraron telómeros
más cortos que en la mucosa normal pero más largos que en la tumoral. La ratio de la
longitud del telómero (RLT) fue factor pronóstico independiente para la supervivencia
a los 2 años en el colon (p = 0.022). El IT (índice de telomerasa) fue un factor pronóstico
independiente para la progresión de la enfermedad a los 2 años (p = 0.035) y para la
supervivencia global a los 2 y 4 años solamente en el recto (p = 0.040; p = 0.030).
CONCLUSIONES: La AT aumenta a medida que lo hace el grado de malignidad del
tumor mientras que la LT disminuye. El IT es un factor pronóstico independiente para la
progresión de la enfermedad a los 2 años y para la supervivencia a los 2 y 4 años en los
pacientes con cáncer de recto. La RLT es un factor pronóstico independiente para el
tiempo de supervivencia global a los 2 años en los pacientes con cáncer de colon.

INTRODUCTION: Colorectal cancer is the second cancer in incidence and mortality.
Although in the last years the improvements in surgical, adjuvant and neoadjuvant
therapies contributed to increase the survival rates and percentage of healings. But
we still use the same prognostic factors, based on the anatomopathological
characteristics of tumour. The fact that colorectal carcinogenesis is one of the most
known allows to study the genes or other factors that can be altered during this
process, and use them as possible prognostic factors to prevent the evolution of the
illness. For this study the factors selected are: telomerase activity (TA), telomere
length (TL) and TRF1 (telomeric repeat factor) expression due to their implication in
the regulation and homeostasis of telomeres, which have an important role in the
genome stability, cellular viability and carcinogenic development.
HYPOTHESIS AND OBJECTIVES: To analyse in our series of patients with colorectal
cancer (CRC) telomerase activity, telomere length and TRF1 expression, to observe
its behaviour in the adenoma-carcinoma sequence and to determine if they could
be new independent prognostic factors for disease-free survival and overall survival.
METHODS AND PATIENTS: The TA was determined by F-TRAP in tumoral, transitional
and normal mucosa and polyps in 108 patients. The TL was analysed by Shoutern
blot in tumoral and normal mucosa and blood cells in patients with CRC and in
blood cells and colon mucosa in healthy patients. The TRF1 expression was
determined by Western blot in tumoral and normal mucosa in patients with CRC. TA,
TL and TRF1 expression were related to anatomopathological characteristics of
patients. The disease-free survival and overall survival were realized and
independent prognostic factors were studied at 2 and 4 years.
RESULTS: The TA in tumoral mucosa was higher than normal mucosa (p< 0.001), while
the differences were not significant between transitional and normal mucosa. TA in
the polyps was higher than normal mucosa but was lower than tumoral mucosa,
and the isolated polyps had a higher TA than synchronic polyps (p = 0.020). The TL
mean in tumoral mucosa was shorter than normal mucosa (p< 0.001). When we
compared tumoral-normal TL in each patient we obtained that TL was maintained in
55% tumours, elongated in 10% and shortened in 35%. The TL in tumoral and normal
mucosa showed a parallel behaviour (p< 0.001). TL did not correlate with TA. TL in
blood cells was similar in patients with and without CRC, but TL in normal mucosa in
patients with CRC was shorter than normal mucosa in healthy patients. TL in healthy
patients correlates with age in blood cells and also in normal mucosa (p< 0.001; p =
0.037). Tumoral mucosa expressed greater levels of TRF1 and this expression seemed
to be related to LT but not to TA. Polyps showed a greater TA than their respective
normal mucosa and lower than tumoral mucosa, and polyps showed shorter
telomeres than normal mucosa but longer than tumoral mucosa. The telomere
length ratio (TLR) was an independent prognostic factor for overall 2 years survival in
patients with colon cancer (p = 0.022). Telomerase index (TI) was an independent
prognostic factor for 2 years disease-free survival (p = 0.035) and for overall
survival at 2 and 4 years in patients with rectal cancer (p = 0.040; p = 0.030).
CONCLUSIONS: TA increases and TL reduces as the tumour malignancy degree
increases. The TI is an independent prognostic factor for diseases-free survival at 2
years and for overall survival at 2 and 4 years in patients with rectal cancer. The TLR is
an independent prognostic factor for overall survival at 2 years in patients with colon
cancer.